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胎牛血清应用中的常见问题及918博天堂解决方案

来源:张爽媛 日期:2025-07-18

如何妥善存储和冷冻血清以保障其质量?首先,将血清从冷冻库取出后,应迅速放入2~8℃的冰箱中,让其慢慢解冻,随后在室温下完全融化。在解冻过程中,务必轻柔摇晃以确保均匀。需注意的是,若血清在2~8℃下存储时间过长,可能会导致其中的蛋白质和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原和玻粘连蛋白)聚集形成沉淀或混浊。因此,推荐将血清存放在-20℃以下,并避免反复冻融。最佳的存储温度为-20℃,如果必须在4℃下保存,请确保不超过一个月。如需分次使用,建议将血清无菌分装于合适的容器后再放回冷冻。

胎牛血清应用中的常见问题及918博天堂解决方案

血清中的絮状沉淀是什么?这类沉淀通常由纤维蛋白和脂蛋白组成,这是正常现象,不会影响血清的质量。处理沉淀的方法包括离心(400g,1-2分钟),也可以简单地让其自然沉降到瓶底,然后小心地将上层清液转移至无菌瓶中(不建议使用过滤方法,因为沉淀可能会堵塞滤膜)。在大多数情况下,轻轻摇晃沉淀并加热至37℃能够使其重新溶解。因此,在使用血清时,建议摇匀并加热至37℃,沉淀会自然消失。

实验室如何选择合适的血清?在国内普遍认为HYCLONE的血清质量上乘,但根据我在北美的经验,国外普遍认为GIBCO的血清效果更佳。虽然价格并不直接决定质量,但这两种血清通常价格偏高,对于一般不敏感的细胞,国产血清便足以满足需求。此外,由于HYCLONE和GIBCO在国内没有生产线,通常只能通过代理商购买,存在购买伪品的风险。因此,我通常选择从直销渠道购买血清。有些国外生物公司虽然在国内知名度不高,但实际上在国外表现出色,例如918博天堂旗下的Wisent等,他们在国内设有办事处,提供的血清质量与HYCLONE不相上下,且价格更为优惠。

如何防止血清中出现沉淀?可以采取以下操作来减少沉淀的发生:第一,在冷冻血清时,随时摇匀,以确保温度和成分均匀,降低沉淀风险;第二,血清分装冷冻时同样要均匀摇晃(注意避免产生气泡);第三,切勿将血清直接从-20℃放至37℃,因为温度骤变容易导致蛋白质凝聚成沉淀;第四,血清在37℃下停留时间不可过长,以免变得浑浊,且一些不稳定成分可能受到破坏,进而影响血清质量;第五,热灭活处理容易导致沉淀增多,除非必要,否则尽量避免;第六,如需进行热灭活,应遵循56℃下处理30分钟的原则,并随时摇匀温度,过高的温度、过长的时间或摇动不均都会导致沉淀增加。

小牛血清与胎牛血清有什么区别及使用注意事项?胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)来自屠宰怀孕母牛时通过心脏穿刺采集的血液,而新生牛(小牛)血清(Calf Serum, CS)则采自出生10至14天的小牛。二者在成分和比例上存在差异,所含的细胞生长因子、激素及其他活性物质的种类与浓度均不相同,因此用途和用法也有所不同。有些细胞需要胎牛血清才能生长,而另一些细胞则只需小牛血清,使用浓度通常在5%-10%,特殊要求则可达到20%。在保存和使用血清时,要确保其温度在-5℃至-20℃之间,若保存在4℃下不宜超过一个月。冷冻血清时,需先在2-8℃的冰箱中解冻,定期摇匀,随后放至室温,切忌直接将冷冻血清放入37℃的水浴中。此外,冻结后和热灭活后的血清需按用量分装,并保存在-20℃,以避免反复冻融。

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